猪A组轮状病毒Vp6基因与乳酸菌非抗性表达载体的重组及在大肠杆菌中的表达

来源 :微生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liongliong482

【摘要】

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以猪A组轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,扩增了1194bp的Vp6基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-T Vector中,构建克隆质粒pGEM-T-V

【作者】

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王春凤丛彦龙刘尚高李玉

【机构】

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吉林农业大学动物科学与技术学院,中国农业大学动物医学院,吉林农业大学菌物研究所

【出处】

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微生物学报

【发表日期】

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2005年5期

【关键词】

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轮状病毒 VP6基因乳酸菌表达载体大肠杆菌 Rotavirus Vp6 gene Lactobacillus vector Escherichia c

【基金项目】

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国家高技术研究发展计划(863计划)，国家自然科学基金，吉林省科技厅科研项目，吉林省杰出青年科学基金，中国博士后科学基金，吉林农业大学校科研和教改项目

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以猪A组轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,扩增了1194bp的Vp6基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-T Vector中,构建克隆质粒pGEM-T-Vp6.用SacⅠ和KpnⅠ双酶切pGEM-T-Vp6和以胸苷酸合成酶基因(thymidylate synthase,thyA)为选择压力的非抗生素抗性的穿梭表达载体pW425t,并将纯化的Vp6基因亚克隆至表达载体pW425t中,构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW42

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