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目的
筛选鲍曼不动杆菌外膜蛋白(outer membrane protein 33×103～36×103, OMP33-36)抗原的B细胞、T细胞表位。
方法运用生物信息学软件预测OMP33-36蛋白分子小鼠B细胞及T细胞表位并人工合成相应肽段；构建重组质粒pET-30a-OMP33-36并原核表达、纯化获得OMP33-36蛋白；以OMP33-36蛋白免疫BALB/c小鼠，5周后收集小鼠血清并分离小鼠脾脏细胞。间接ELISA法检测小鼠血清中B细胞表位抗体水平，双夹心ELISA法检测经候选T细胞表位体外刺激后脾细胞分泌IFN-γ量。
结果构建候选B细胞和T细胞表位各3条，分别为PB1、PB2、PB3，PT1、PT2、PT3；间接ELISA结果显示，PB1及PB2与OMP33-36蛋白免疫组小鼠血清发生反应，其A450值与对照组相比显著升高(P<0.05)；双夹心ELISA结果显示，PT3刺激免疫组小鼠脾脏细胞产生的IFN-γ量与对照组相比显著升高(P<0.05)。
结论成功构建并筛选出鲍曼不动杆菌OMP33-36蛋白的2个B细胞表位PB1及PB2，1个T细胞表位PT3。