大肠杆菌F18ac菌毛FedA蛋白的表达与鉴定

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根据已经发表的F18ac菌毛A亚单位的基因序列(FedA)设计一对引物,利用PCR技术从重组质粒T 8813A中扩增到一段序列,并按预定的阅读框插入表达性质粒载体pGEX-6p-1中的谷胱苷肽转移酶(GST)基因的下游,获得重组质粒pPFedA/ac,并转化大肠杆菌BL 21获得重组菌PPFedA/ac.琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明,该序列大小为456 bp,与已发表的FedA/ac结构编码序列完全一致.通过对菌体裂解物的SDS-PAGE分析以及Western-blotting鉴定,证明重组大肠杆菌
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