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目的构建肠聚集性大肠杆菌ybtE缺失突变株，为下一步咖征基因功能的研究奠定基础。方法应用PCR扩增肠聚集性大肠杆菌的ybtE基因，将其克隆至pUC18载体，酶切缺失988bpybtE片段，并插入998bp的卡那霉素抗性基因，利用定向克隆技术将突变的ybtE片段克隆至自杀质粒pKTN701，形成重组自杀质粒。将携带重组自杀质粒的SM10λpir与EAEC17-2进行接合转移，利用同源重组，根据卡那霉素抗性筛选并鉴定接合子。结果经PCR、酶切和探针杂交鉴定，得到2株肠聚集性大肠杆菌ybtE缺失突变株。结论成功