【摘 要】
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目的 在大肠埃希菌中表达严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,N蛋白),并进行纯化,用于制备SARS-CoV-2检测试剂.方法 将含N蛋白基因的重组质粒pET28a转化感受态大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达N蛋白,考察Ni柱亲和层析与SP强阳离子交换层析和CM弱阳离子交换层析对重组N蛋白的纯化效率,制备胶体金免疫检测试剂并检测灭活血清.结
【机 构】
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岳阳职业技术学院,湖南岳阳414000;湖南康润药业股份有限公司,湖南岳阳414000;免疫诊断试剂湖南省工程研究中心,湖南岳阳414000;湖南康润药业股份有限公司,湖南岳阳414000;免疫诊断试
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目的 在大肠埃希菌中表达严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,N蛋白),并进行纯化,用于制备SARS-CoV-2检测试剂.方法 将含N蛋白基因的重组质粒pET28a转化感受态大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达N蛋白,考察Ni柱亲和层析与SP强阳离子交换层析和CM弱阳离子交换层析对重组N蛋白的纯化效率,制备胶体金免疫检测试剂并检测灭活血清.结果 表达的重组N蛋白相对分子质量约49 000,表达量约占包涵体总蛋白的30％.Ni2+亲和层析对重组N蛋白的选择性较低,通过强阳离子交换与弱阳离子交换两步层析,实现了重组N蛋白在色谱柱上的复性和纯化,纯度大于90％.以此制备的免疫胶体金检测试剂可初步用于血清中相应抗体的检测.结论 复性后的重组N蛋白,具有较好的生物活性,可用于诊断试剂开发,复性工艺对其他重组蛋白质的纯化具有借鉴意义.
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目的 利用生物信息学方法分析食管鳞癌基因表达谱芯片,筛选与食管鳞癌相关的核心基因,为食管鳞癌的分子诊断和精准靶向治疗奠定基础.方法 从基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中寻找3个不同的食管鳞癌基因表达谱芯片GSE45168、GSE38129、GSE70409,利用 GEO2R筛选出食管鳞癌较正常癌旁组织具有显著表达差异的基因(differentially expressed genes,DEGs).通过Draw Venn Diagram对3个基因表达谱芯片的差异基因取
目的 比较脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated polio vaccines,IPV)与口服减毒活疫苗(oral polio vaccines,OPV)安全性和免疫原性的差异.方法 检索中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据资源系统、维普、Pubmed数据库,搜集接种IPV和OPV的安全性及免疫原性随机对照试验(randomized controlled trial,RCT)文献,提取资料和方法学评估,采用Review Manager 5.3软件对两种类型疫苗的安全性及免疫原性进行Meta分析.结
基于SOR理论模型视角,构建了多渠道零售环境下消费者在线渠道迁徙意愿模型,探究了外部刺激因素、消费者内在体验因素与在线渠道迁徙意愿之间的作用机理.实证结果表明:外部刺激因素中在线渠道吸引力、零售商努力显著正向影响消费者在线渠道迁徙意愿;消费者内在体验因素中多渠道自我效能感显著正向影响消费者在线渠道迁徙意愿,感知渠道转换成本显著负向影响消费者在线渠道迁徙意愿;感知渠道转换成本在多渠道自我效能感、在线渠道吸引力、零售商努力与消费者在线渠道迁徙意愿之间起部分中介作用,多渠道自我效能感在在线渠道吸引力与消费者在线
随着我国对生态文明的重视不断加强,山东省也加强了对自然资源的管理,本文将简述在自然管理上的初步成效,对还存在的问题进行一定的分析,通过对自然资源规划编制的实施建议进行一定的思考,提出一些问题的解决方案,以供参考.
目的 在NewBrunSwick310 14 L生物反应器中培养表达重组人长效生长激素(recombinant human growth hor-mone Fc fusion protein,rhGH-Fc)的CHO细胞,优化工艺参数以提高表达量,并进行NewBrunSwick310 14 L到New-BrunSwick510 40L生物反应器的工艺放大.方法 在原有14 L培养工艺基础上,调节转速、通气速率等参数,并对参数调整时期进行工艺优化.通过对渗透压、乳酸、铵离子、钾离子等代谢过程产物的检测来确保
目的 制备重组人血白蛋白蛋白质含量RS20国家标准品,用于重组人血白蛋白产品的质量控制.方法 以重组人血白蛋白为原料,经灭菌注射用水稀释、除菌过滤后,进行分装、冻干,制备重组人血白蛋白蛋白质含量RS20国家标准品.8家实验室采用凯氏定氮法进行协作标定,并检测标准品的分装误差、水分含量、均匀性及稳定性.结果 8家实验室测定本批标准品蛋白质含量实验室间均值为19.05 mg/mL,95％置信区间为18.80～19.31 mg/mL,均值标准差为0.308 7 mg/mL,标准误为0.109 1 mg/mL,相
作为国家治理传统中心轴的家国关系自现代转型以来经历了困境:在实践中被捍卫、被维系,在学理上却被抨击、被解构.走出西方现代性的单向思维控制,反思家父长制、家产官僚制、家天下等话语,是重构国家治理体系理论的必要条件.依据钱穆著述,公家秩序论尝试提出植根于中国经验和智慧的解释框架.政治与社会一体、政治法统尊重社会是家国关系的精髓.人伦主义主张个体通过耦伍共成树立自我,把家作为公家秩序的起点和原型,国和天下又在家的推衍层积中形成,这个元宪制涵括了不同于个人主义的群己公私观.只有建立在人类性情关系上的大群秩序才能扩
目的 建立适用于疫苗生产车间的新生牛血清(newborn bovine serum,NBS)快速筛选方法.方法 以12批NBS(编号为A、B、D、E、F、G、H、I、J、K、L、、M)作为待评价血清,制备细胞培养液,采用细胞收获量测定法、微量终点稀释测定法、相对增长率测定法、细胞3次连续传代培养法、细胞倍增时间测定法5种方法培养Vero细胞,采用配对样本t检验进行统计学分析.结果 细胞收获量测定法筛选出J、F、K、B、E、A、M、L、H可作为备用血清;微量终点稀释测定法筛选出J、F、A、E、K、L、M可作
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