【摘 要】
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目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)-NF-κB信号通路通过骨形态发生蛋白-2(BMP-2)-Smad1信号通路对成骨细胞分化影响的分子机制。方法应用BMP-2体外诱导鼠肌源细胞C2C12向成骨
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(30672133)
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目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)-NF-κB信号通路通过骨形态发生蛋白-2(BMP-2)-Smad1信号通路对成骨细胞分化影响的分子机制。方法应用BMP-2体外诱导鼠肌源细胞C2C12向成骨细胞分化模型,瞬时转染表达其下游效应物,通过实时RT-PCR以及蛋白电泳和免疫印迹技术(Western-blot),检测其下游效应物Smad1与核转录因子(NF-kB)及其抑制剂(IκBα),研究TNF-α和NF-κB对BMP-2-Smad1信号通路的影响。结果 TNF-α能够将Smad1(BMP-2的下游效应物)的活性从对照组的2.04倍降低至0.63倍。NF-κB过表达则将Smad1活性从2.04倍降低至0.39倍。蛋白质印迹实验可见,TNF-α能明显降低BMP2活化的C2C12细胞中磷酸化Smad1的含量,而RT-PCR研究发现其并不能改变Smad1的mRNA丰度。结论 TNF-α抑制成骨细胞分化其分子机制是通过TNF-α激活NF-kB而降低BMP-2信号通路中磷酸化的Smad1,进而抑制BMP-2-Smad1通路活性而发挥作用。提示持续性的炎症反应能直接抑制成骨细胞的分化和骨形成。
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