肺癌患者外周血miR-214表达及对肺癌细胞凋亡和多药耐药的影响

来源 :中华实用诊断与治疗杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cyld2006_ldcy
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目的探讨miR-214在肺癌患者外周血中的表达及其对肺癌细胞存活、凋亡、多药耐药的影响。方法小细胞肺癌(small cell lung cancer, SCLC)患者30例为SCLC组,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者30例为NSCLC组,30例体检健康者为对照组,采用实时荧光定量PCR法检测3组外周血miR-214相对表达量。取对数生长期人SCLC H446细胞、人NSCLC A549细胞,人正常肺上皮BEAs-2B细胞,采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞miR-214相对表达量;H446、A549细胞转染miR-214 mimics质粒,BEAs-2B细胞不转染miR-214 mimics质粒,于转染24 h采用CCK-8法检测3组细胞存活率,TUNEL法检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法检测P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)、肺耐药相关蛋白(lung resistance-related protein, LRP)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein, MRP) mRNA相对表达量,Western blot法检测P-gp、LRP、MRP蛋白表达,MTT比色法检测阿霉素、长春新碱、依托泊苷、顺铂、吉西他滨处理48 h的半数抑制剂量(the half maximal inhibitory concentration, IC50)。结果 SCLC组、NSCLC组、对照组外周血miR-214相对表达量(0.572±0.024、0.711±0.048、1.001±0.001)依次增高(P<0.05);H446细胞、A549细胞、BEAs-2B细胞miR-214相对表达量(0.476±0.078、0.710±0.042、1.000±0.001)依次增高(P<0.05);转染24 h,H446细胞、A549细胞、BEAs-2B细胞存活率[(43.5±5.2)%、(73.3±4.5)%)、(100.0±0.1)%]依次增高(P<0.05),细胞凋亡率[(18.221±1.721)%、(13.523±1.825)%、(5.296±0.331)%]依次降低(P<0.05);转染24 h,A549、H446、BEAs-2B细胞P-gp mRNA相对表达量(0.683±0.047、0.817±0.021、1.002±0.005)、LRP mRNA相对表达量(0.415±0.062、0.678±0.077、1.001±0.002)和MRP mRNA相对表达量(0.502±0.072、0.708±0.049、1.000±0.003)依次增高(P<0.05),P-gp蛋白相对表达量(1.225±0.022、1.763±0.021、2.401±0.032)、MRP蛋白相对表达量(1.325±0.072、1.662±0.068、1.872±0.074)依次增高(P<0.05);LRP蛋白相对表达量在A549、H446细胞(1.214±0.121、1.342±0.054)低于BEAs-2B细胞(1.825±0.0354)(P<0.05),A549细胞与H446细胞比较差异无统计学意义(P>0.05);阿霉素、长春新碱、依托泊苷、顺铂、吉西他滨作用48 h,H446、A549细胞IC50值低于BEAs-2B细胞(P<0.05)。结论肺癌患者miR-214表达增高,miR-214可抑制肺癌细胞的增殖和多药耐药性,促进肺癌细胞凋亡。
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