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【目的】以北极星、阿尔刚金、皇后2000及国产紫花苜蓿4个苜蓿品种下胚轴为外植体，建立其稳定、高效的离体培养再生体系，为基因转化改良苜蓿性状奠定基础。【方法】研究了种子预处理方法、培养基、基因型以及蔗糖质量浓度对苜蓿下胚轴分化特性的影响。【结果】低温4℃预处理有利于提高苜蓿下胚轴愈伤组织的出愈率和绿苗分化率；其最佳诱导激素组合为＂MS＋1.0 mg/L 2，4-D＋2.0 mg/L 6-BA＋5.5 g/L琼脂＋30 g/L蔗糖＂和＂MS＋2.0 mg/L 2，4-D＋2.0 mg/L 6-BA＋5.5