【摘 要】
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目的探讨微小RNA(microRNA-106a,miR-106a)通过调节基质金属蛋白酶抑制物2(tissue inhibitor of metalloproteinases 2,TIMP2)的表达而诱导人胃癌BGC-823细胞的腹腔种植转移
【机 构】
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宁夏医科大学总医院消化内科,宁夏医科大学总医院病理科,西安交通大学第一附属医院消化内科
【基金项目】
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宁夏自然科学基金资助项目(No.NZ16148);宁夏高等学校优秀青年教师培育基金项目(No.NGY2016123)~~
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目的探讨微小RNA(microRNA-106a,miR-106a)通过调节基质金属蛋白酶抑制物2(tissue inhibitor of metalloproteinases 2,TIMP2)的表达而诱导人胃癌BGC-823细胞的腹腔种植转移。方法人胃癌细胞株BGC-823传代培养至对数生长期。细胞分3组:胃癌细胞BGC-823组、BGC-823/anti-miR-106a(拮抗剂)组和BGC-823/negative control组。Real-time PCR鉴定拮抗效果。Transwell法检测细胞体外迁移侵袭能力。以小切口注射方式制备裸鼠腹腔内移植瘤模型,动物分2组:miR-antagomir组和miR-NC组。大体观察裸鼠胃癌移植瘤生长情况。免疫组化法和Western印迹法联合检测TIMP2在腹腔内各器官上的表达。结果 BGC-823/anti-miR-106a组miR-106a表达下调,降低倍数2-△△Ct=0.05±0.01,与NC组相比具有统计学差异(t=-18.001,P<0.001)。细胞水平外源性沉默miR-106a基因,BGC-823/anti-miR-106a组迁移、侵袭的细胞数量均低于BGC-823和BGC-823/negative control组,差异均有统计学意义(P<0.001)。移植瘤体内实验显示miR-106a表达下调削弱BGC-823细胞在裸鼠腹腔内的种植转移能力,表现为种植瘤结节数量和体积的减少;当miR-106a表达受抑时,免疫组化法和印迹法均显示miR-antagomir组TIMP2蛋白表达量高于miR-NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BGC-823细胞株具备裸鼠成瘤能力,沉默miR-106a抑制胃癌细胞的侵袭转移提示其具有癌基因样作用;miR-106a可能通过作用于TIMP2诱导BGC-823细胞腹腔种植转移能力增强。
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