长距离PCR法扩增RHDV全基因组及其序列分析

来源 :西北农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuanjian2009
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从人工感染RHDV致死的兔肝组织中提取病毒总RNA,应用特异性引物将病毒RNA反转录成cDNA.以此为模板用长距离PCR法扩增RHDV全基因组,将成功扩增出的RHDV全基因组克隆到pMD18-T载休中,经PCR鉴定及酶切分析后进行序列测定。测序结果表明,JX97全基因组由7437个核苷酸组成,包括由9个核苷酸组成5'NCR、59个核苷酸组成3’NCR和一个至少含有27个核苷酸的poly(A)尾。序列比较结果显示,RHDVJX97株的衣壳蛋白与已报道的参考毒株具有较高的序列同源性,均在90%以上,提示所有的
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