【摘 要】
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目的探讨终板软骨细胞体外自然退变模型中转录因子(NF)－κB信号通路表达变化及意义。方法分离获取大鼠终板软骨细胞，体外培养建立终板软骨细胞自然退变模型。根据细胞传代次数分P2代细胞(空白对照组)，P5代细胞(体外自然退变组)及NF－κB信号通路抑制组(细胞传代中加入Bay11－7082的P5代细胞)。观察细胞形态学变化，甲苯胺蓝染色鉴定细胞表型，阿新蓝染色观察细胞外基质变化。实时聚合酶链反应检测各
【机 构】
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241001 安徽省芜湖市，皖南医学院第一附属医院弋矶山医院脊柱外科,241001 安徽省芜湖市，皖南医学院第一附属医院弋矶山医院脊柱外科,中国科学院上海生命科学院上海交通大学健康科学研究所骨科细胞与
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目的探讨终板软骨细胞体外自然退变模型中转录因子(NF)－κB信号通路表达变化及意义。
方法分离获取大鼠终板软骨细胞，体外培养建立终板软骨细胞自然退变模型。根据细胞传代次数分P2代细胞(空白对照组)，P5代细胞(体外自然退变组)及NF－κB信号通路抑制组(细胞传代中加入Bay11－7082的P5代细胞)。观察细胞形态学变化，甲苯胺蓝染色鉴定细胞表型，阿新蓝染色观察细胞外基质变化。实时聚合酶链反应检测各组细胞中SOX－9基因，Ⅱ型胶原，蛋白聚糖，人基质金属蛋白酶(MMP)13的表达情况，核质分离及免疫印迹检测胞核与胞质中NF－κB信号通路相关蛋白P65、p－P65、IκBα、p－IκBα表达变化。
结果随着体外传代的进行终板软骨细胞表型逐渐丢失，阿新蓝染色可见细胞外基质减少，P5代细胞(体外自然退变组)较P2代细胞(空白对照组)SOX－9(P5/P2＝0.488, P<0.01)、蛋白聚糖(P5/P2＝0.287, P<0.01)、Ⅱ型胶原(P5/P2＝0.182，P<0.01)表达明显降低，NF－κB信号通路相关基因P65入核增加，胞质中p－IκBα增高，NF－κB信号通路相关基因MMP13(P5/P2＝1.324, P<0.05)表达明显上升，NF－κB信号通路抑制组较P5代细胞(体外自然传代组)核内p－P65减少，胞内p－IκBα降低，NF－κB信号通路相关基因MMP13(Bay11－7082/P5＝0.611, P<0.05)表达降低，信号通路抑制组中Ⅱ型胶原(Bay11－7082/P5＝4.173, P<0.01)、蛋白多糖(Bay11－7082/P5＝2.732, P<0.05)、SOX－9(Bay11－7082/P5＝1.567, P<0.05)等基因表达明显回升。
结论NF－κB信号通路在终板软骨细胞体外退变中发挥重要的调节作用，调控NF－κB信号通路可能会改善椎间盘退变。
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