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据GenBank发表的牛坏死杆菌H05菌株43ku外膜蛋白(43KOMP)基因的核苷酸序列,设计了4对含有BamHI和XhoI酶切位点的特异性引物,通过PCR扩增坏死杆菌43KOMP基因相互重叠的4个截短片段,PCR扩增产物经BamHI和XhoI酶切消化后克隆至pET-32a原核表达载体,4个截短片段的阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,通过PCR筛选阳性克隆,然后利用IPTG进行诱导表达。结果显示,牛坏死杆菌43KOMP基因4个截短片段均成功获得了表达,表达的重组融合蛋白大小均为30ku左