【摘 要】
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经RT-PCR从人新鲜扁桃体组织中扩增人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)中的B box(88～162残基)的cDNA,构建于载体pUC19,经测序后与GentBank中报道的已知序列完全一致,再构建于原核表达
【机 构】
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第三军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,匹兹堡大学
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经RT-PCR从人新鲜扁桃体组织中扩增人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)中的B box(88～162残基)的cDNA,构建于载体pUC19,经测序后与GentBank中报道的已知序列完全一致,再构建于原核表达载体pQE-80L/DHFR中,表达并鉴定目的蛋白.经Ni2+亲和层析柱、多粘菌素B层析柱纯化获得高纯度的DHFR/HMGB1 B box蛋白,然后将此重组HMGB1 B box加入到人外周血单核细胞(PBMCs)中,37℃,5%CO2下,刺激PBMCs 6 h,用ELISA检测PBMCs释放TNF-
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