【摘 要】
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为确保光核桃ISSR反应条件的稳定性,以改良的CTAB法提取光核桃基因组DNA,对模板DNA浓度、MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq酶用量、引物浓度等因素进行了优化,确立了光核桃ISSR反应
【机 构】
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东北林业大学生命科学学院,西藏大学农牧学院,
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为确保光核桃ISSR反应条件的稳定性,以改良的CTAB法提取光核桃基因组DNA,对模板DNA浓度、MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq酶用量、引物浓度等因素进行了优化,确立了光核桃ISSR反应体系。结果表明:最佳反应体系为模板浓度40ng/μL、引物浓度0.4μmol/L、Mg2+的浓度2.5mmol/L、酶浓度0.5U、dNTPs浓度0.5mmol/L,为光核桃这一优质的种质资源的遗传多样性研究奠定了理论基础。
In order to ensure the stability of ISSR reaction conditions, the genomic DNA was extracted by modified CTAB method. The template DNA concentration, MgCl2 concentration, dNTPs concentration, Taq enzyme dosage, primer concentration and other factors were optimized to establish the ISSR reaction system. The results showed that the optimal reaction system was 40 ng / μL of template, 0.4 μmol / L of primer, 2.5 mmol / L of Mg2 +, 0.5 U / L and 0.5 mmol / L of dNTPs. The genetic diversity of resources laid the theoretical foundation.
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