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目的
探讨鞘内注射热敏感TRPV3离子通道的小分子干扰RNA(siRNA)慢病毒对骨癌痛大鼠疼痛行为的影响。
方法鞘内成功置管雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只,随机分为4组(每组10只),假手术组(S组),骨癌痛模型组(B组),空载慢病毒组(C组)和TRPV3-siRNA慢病毒组(T组)。大鼠右侧胫骨平台接种Walker256细胞或者灭活细胞。造模后第1~6天,C组和T组分别鞘内给予5 μl空载慢病毒和TRPV3-siRNA慢病毒。于造模前、造模后第1、3、6、9、12、15、18、21天测量同侧足底热辐射刺激潜伏期(PWTL)和机械刺激痛阈值(PWMT),并取L4~L6段腰膨大处,RT-PCR和Western Blot检测TRPV3含量变化。
结果造模后第6天,B组PWTL、PWMT较S组和基础值减小,差异具有统计学意义(P<0.05)。造模后第9天,T组PWTL[(17.52±2.15)s]较C组PWTL[(14.36±1.67)s]显著增高(P<0.05)。造模后第21天,T组PWMT[(16.89±1.54)g]与C组PWMT[(15.53±1.36)g]无明显差异(P>0.05)。RT-PCR和WB结果表明T组TRPV3的mRNA和蛋白比C组明显减少(P<0.05)。
结论鞘内注射TRPV3-siRNA慢病毒,抑制TRPV3离子通道表达,从而降低骨癌痛大鼠的PWTL,但不能改变PWMT。