【摘 要】
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目的 观察高浓度氨基酸、高糖、高浓度氨基酸高糖混合物对系膜细胞增殖及细胞外基质合成的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪法观察甘露醇(13.3mmol/L)、高浓度氨基酸
【机 构】
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上海交通大学附属第一人民医院肾内科
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目的 观察高浓度氨基酸、高糖、高浓度氨基酸高糖混合物对系膜细胞增殖及细胞外基质合成的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪法观察甘露醇(13.3mmol/L)、高浓度氨基酸(较DMEM氨基酸浓度高1.5-6倍,渗透浓度13.3 mmol/L)、高糖(30.5ramol/L)、高浓度氨基酸高糖混合物分别对系膜细胞增殖的影响;RT-PCR方法检测转化生长因子β1(TGF-β1)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)和纤连蛋白(FN)mRNA的表达水平;酶联免疫法检测TGF-β1水平;Western印迹法及放射免疫法测定ColⅣ、FN蛋白表达.结果 (1)高浓度氨基酸、高糖、高浓度氨基酸高糖混合物均能刺激系膜细胞增殖,且具有时间依赖性,作用48 h时细胞增殖最明显;而高浓度氨基酸高糖混合物刺激细胞增殖作用最强.(2)高浓度氨基酸高糖混合物与细胞作用48 h,能明显影响细胞周期,使G0/G1期细胞减少,S期细胞增加.(3)高浓度氨基酸、高糖、高浓度氨基酸高糖混合物均能上调系膜细胞TGF-β1的基因表达;促进TGF-β1蛋白合成增加[单位ng·ml-1·(105细胞)-1](3023±85、3163±80、3321±85比1506±63,均P
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