论文部分内容阅读
目的 探讨缺失第8外显子的沉默信息调节因子l(SIRT1)剪接变异体(SIRT1-△Exon8)和SIRT1全长(SIRT1-FL)在氧化应激损伤中可能发挥的不同作用.方法 在人胚肾293T细胞分别转染SIRTl-AExon8干扰质粒和SIRT1-FL过表达质粒,给予过氧化氢(H2O2)诱导氧化应激损伤模型,应用CCK-8检测细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)活性测定法检测细胞的损伤程度,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞内活性氧簇(ROS)水平,Real-time PCR法检测细胞SIRTl-AExon8和SIRT1-FL mRNA的水平.结果 H2O2(50～800 μmol/L)可剂量依赖性地诱导细胞氧化应激损伤,包括细胞活力下降,LDH释放增加,细胞凋亡和胞内ROS含量增加,并引起SIRT1-FL mRNA水平降低和SIRT1-△Exon8 mRNA表达增加;此外,过表达SIRT1-FL或干扰SIRT1-△Exon8也可以部分抑制H2O2(400 μmol/L)引起的细胞氧化应激损伤.结论 SIRTl-μ△Exon8可能促进细胞的氧化应激损伤,而SIRT1-FL则发挥相反的作用.