人源抗HBsAg dsFv抗体靶向干扰素重组质粒的构建与表达

来源 :解放军医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：malsway

【摘要】

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目的构建抗体靶向干扰素的重组表达质粒pEE14.1-dsFvαpr＋,并在真核细胞中验证重组质粒的表达情况。方法通过重叠延伸PCR将dsFv抗体重链基因与带正电荷的DNA负载区基因融合,并

【作者】

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江乐阎瑾琦郭炳冉任杰于继云

【机构】

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曲阜师范大学生命科学学院,军事医学科学院基础医学研究所,解放军总医院泌尿外科

【出处】

：

解放军医学杂志

【发表日期】

：

2010年4期

【关键词】

：

干扰素Α 肝炎表面抗原乙型二硫键稳定性Fv抗体质粒基因表达 interferon-alpha hepatitis B surface antigens

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目的构建抗体靶向干扰素的重组表达质粒pEE14.1-dsFvαpr＋,并在真核细胞中验证重组质粒的表达情况。方法通过重叠延伸PCR将dsFv抗体重链基因与带正电荷的DNA负载区基因融合,并在抗体轻链α干扰素融合基因3′端连入6×His标签。先在过渡载体pCI-GPI中实现轻、重链复合基因的连接,然后连入pEE14.1中,最终构建重组表达质粒pEE14.1-dsFvαpr＋。将重组质粒LipofectamineTM2000瞬时转染到CHO-K1细胞,采用RT-PCR、ELISA和Western b

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