【摘 要】
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目的 探讨左旋尼汀对心肌细胞凋亡的抑制作用及其可能的作用机制.方法 采用培养的新生乳大鼠心肌细胞制备H2O2 200 μmol· L-1氧化损伤模型.实验分为正常对照组、H2O2 200
【机 构】
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辽宁医学院分子生物学与新药开发重点实验室,辽宁锦州,121001;锦州市食品药品检验所,辽宁锦州,121000;大同煤总医院,山西大同,037003
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目的 探讨左旋尼汀对心肌细胞凋亡的抑制作用及其可能的作用机制.方法 采用培养的新生乳大鼠心肌细胞制备H2O2 200 μmol· L-1氧化损伤模型.实验分为正常对照组、H2O2 200 μmol·L -1模型组、左卡尼汀(0.3,0.6及1.2 mmol· L-1)组、左卡尼汀1.2 mmol·L -1+ H2O2 200 μmol·L-1组.左卡尼汀0.3,0.6和1.2 mmol· L-作用1h后加入H2O2 200 μmol·L-1培养12 h,MTT法测定心肌细胞存活率,流式细胞仪测定心肌细胞的凋亡率,Western印迹法测定胱天蛋白酶3表达；用试剂盒方法检测过氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平.左卡尼汀1.2 mmol· L-1作用5 min后加入H2O2 200μmol·L-1,采用Till 阳离子测定系统监测5 min的心肌细胞[Ca2+]i瞬间变化.结果 H2O2200 μmol·L-1作用于心肌细胞12 h能引起心肌细胞凋亡.左卡尼汀0.3,0.6和1.2 mmol· L-1能够不同程度的逆转由H2O2所致的损伤,使SOD活性明显增加,MDA水平明显降低(P＜0.01).左卡尼汀1.2 mmol· L-1作用最强,能够明显降低心肌细胞胱天蛋白酶3表达(P＜0.01),明显降低H2O2引起的[Ca2+]i瞬间变化升高(P＜0.01),但对于H2O2引起无钙血清培养的心肌细胞静息钙升高无影响.结论 左卡尼汀能够抑制由H2O2引起的心肌细胞凋亡,该抑制作用可能与其保护细胞膜和减轻钙通道的损害、纠正[Ca2+]i瞬变失调及其抗氧化作用有关.
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