【摘 要】
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目的 研究外源性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)对 β-淀粉样蛋白(Aβ)介导小胶质细胞激活诱导神经干细胞凋亡的作用及对SIRT3/WNT信号通路的影响.方法 利用Transwell系统共培养
【机 构】
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南方医科大学 珠江医院 药剂科,广东 广州,510282
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目的 研究外源性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)对 β-淀粉样蛋白(Aβ)介导小胶质细胞激活诱导神经干细胞凋亡的作用及对SIRT3/WNT信号通路的影响.方法 利用Transwell系统共培养小鼠神经干细胞系C17.2(NSC)与小胶质细胞系BV-2,将C17.2细胞随机分为4组:空白组在下室培养C17.2细胞;对照组在下室培养C17.2细胞,并添加10μmol·L-1 NAD+作用;模型组在上室培养BV-2细胞,下室培养C17.2细胞,并添加10μmol·L-1 Aβ作用;实验组在上室培养BV-2细胞,下室培养C17.2细胞,10μmol·L-1 NAD+预处理2 h后添加10μmol·L-1 Aβ作用.以流式细胞术检测NSC凋亡率,以蛋白免疫印迹法检测NSC中SIRT3、DVL2、DVL3、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达情况.结果 干预48 h,空白组、对照组、模型组及实验组NSC凋亡率分别为(4.88±0.62)％,(4.21±0.28)％,(8.06±0.24)％,(4.92±0.36)％.外源性NAD+添加能降低小胶质细胞激活诱导的NSC凋亡率升高(P<0.01).蛋白免疫印迹法检测可见,与模型组比较,实验组细胞SIRT3、DVL2、DVL3、GSK3β、p-GSK-3β蛋白表达量升高(P<0.01),且与NAD+的作用时间具有相关性.结论 NAD+可抑制Aβ 介导小胶质细胞激活诱发的NSC凋亡,与显著调节SIRT3及WNT信号通路中DVL2、DVL3、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达相关.
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