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目的 建立人类GPA,GPB分子相关基因GYPA,GYPB外显子全长序列的DNA直接测序方法,并将此方法应用于RBC血型MNS抗原的分析.方法 以整群随机抽样法选择从2011年11月至2012年5月在本中心无偿献血的175例健康成年人的全血样品为研究对象.以血清学方法与序列特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法鉴定其MNS血型.根据GenBank提供的NG-007470与NG-007483基因参照序列为依据,自行设计GPA相关基因GYPA全部外显子的7对引物与GPB相关基因GYPB全部外显子的5对引物,探索最佳反应体系与PCR扩增条件,且能同时扩增2个基因全长外显子碱基序列,使用ABI3730XL DNA测序仪进行序列分析,以Oli6installer分析软件分析碱基序列.结果 所建立的测序方法可于同一反应体系、相同PCR扩增条件同时检测GPA,GPB相关基因GYPA,GYPB外显子全长序列,并准确分析本组血液样本的MNS血型的特征.基因测序结果与血清学分析及PCR-SSP鉴定结果完全一致.结论 首次建立了稳定、精确、简捷的基因直接测序分型方法,可用于检测MNS血型基因型,并分析GPA,GPB肽链中氨基酸序列的多态性,为MNS血型系统的研究以及人类群体遗传学及分子进化的研究等方面提供广泛的应用价值。