自噬相关WIPI1基因在结肠癌细胞中的表达及功能

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目的:探讨细胞自噬相关WIPI1基因在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌细胞功能之间的关系。方法:RT-PCR技术检测WIPI1基因在HCT116、SW60、RKO细胞中的表达。利用针对WIPI1基因的shRNA慢病毒感染人低分化结肠癌RKO细胞株,应用Celigo法检测WIPI1敲减对细胞增殖能力的影响;FACS检测WIPI1敲减对细胞周期阻滞能力的影响;Casepase3/7检测WIPI1基因敲减对细胞凋亡的影响;抗体芯片技术检测其可能影响的信号通路。结果:RT-PCR结果证实WIPI1基因在三株结肠癌细胞中表达丰度均为高表达。在基因沉默后,与对照组相比较,RKO细胞增殖受到显著抑制(P<0.05),且凋亡细胞数显著增加(P<0.05),细胞周期阻滞于S期;抗体芯片技术显示:细胞内信号通路中Stat3,Akt(Ser473),mTOR,p38,GSK-3β等相关分子显著下调。结论:沉默细胞自噬相关WIPI1基因对结肠癌细胞起到一定的抑制作用。
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