【摘 要】
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目的 探讨重组腺病毒介导的人激肽释放酶(human tissue kallikrein 1,hKLK1)基因转移对血小板源性生长因子-BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)诱导下的自发性高
【机 构】
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福建省立医院福建医科大学省立临床医学院福建省临床老年病研究所,福建医科大学附属第一医院福建省高血压研究所,深圳市人民医院临床医学研究中心
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目的 探讨重组腺病毒介导的人激肽释放酶(human tissue kallikrein 1,hKLK1)基因转移对血小板源性生长因子-BB(platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)诱导下的自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCSHR)增殖的影响及其机制.方法 自行构建重组腺病毒载体,携带目的 基因hKLK1和标志基因强绿色荧光蛋白.细胞计数法和四甲基偶氮唑盐(MTF)比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞生长周期.蛋白免疫印迹法测定细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p27Kip1、p21Cip1的表达.RT-PCR法测定缓激肽B1受体、B2受体的mRNA表达.结果 (1)hKLK1基因转移呈感染复数依赖性(20～100 M0I)抑制PDGF-BB诱导的VSMCSHR生长,100 MOI时抑制率为39.3%;呈时间依赖性抑制VSMCSHR生长,第5天时达高峰,抑制率为35.2%.(2)hKLK1基因转移可显著抑制PDGF-BB诱导的VSMCSHR增殖,峰值抑制率为30.2%(P＜0.01);细胞周期阻滞于G0/G1期的VSMCSHR明显增多,最大阻滞率为36.4%(P＜0.001).(3)hKLK1基因转移明显上调PDGF-BB诱导VSMCSHR的p27Kip1、p21Cip1表达,而缓激肽B2受体特异性阻断剂Hoe140明显降低p27Kip1、p21Cip1表达.(4)PDGF-BB诱导VSMCSHR的缓激肽B2受体mRNA表达明显增加(P＜0.001),且Hoe140可明显降低其表达(P＜0.01).结论 hKLK1基因转移可抑制PDGF-BB诱导的VSMCSHR增殖,可上调缓激肽B2受体和细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p27Kip1、p21Cip1表达.
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