借助慢病毒将EGFP基因导入西藏小型猪胎儿成纤维细胞

来源 :中国比较医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：kage

【摘要】

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目的借助慢病毒将EGFP基因导入西藏小型猪胎儿成纤维细胞（porcine embryonic fibroblasts,PEFs）,以基于PEFs建立慢病毒介导的外源基因体外投递系统。方法取35d西藏小型猪胚胎,

【作者】

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张晟肖高芳黄黎珍那顺巴雅尔贾俊双姚志芳肖东顾为

【机构】

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南方医科大学比较医学研究所暨实验动物中心,南方医科大学肿瘤研究所

【出处】

：

中国比较医学杂志

【发表日期】

：

2010年4期

【关键词】

：

慢病毒西藏小型猪胎儿成纤维细胞(PEFs) 绿色荧光蛋白 Lentivirus Tibetan miniature pigs Porcine embryo

【基金项目】

：

广东省自然科学基金项目（9151063101000015）, 广东省科技计划项目（2009B060300008）, 广东省医学科学技术研究基金（A2007359）, 南方医科大学优秀中青年科技人才库科研资助金, 广州地区科学仪器协作共用网专用基金（2006176）

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目的借助慢病毒将EGFP基因导入西藏小型猪胎儿成纤维细胞（porcine embryonic fibroblasts,PEFs）,以基于PEFs建立慢病毒介导的外源基因体外投递系统。方法取35d西藏小型猪胚胎,酶消化法分离培养西藏小型猪的PEFs;按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒（携带EGFP基因）包装（脂质体介导的瞬时转染）,随后用病毒上清感染PEFs,24～48h后荧光显微镜下观察是否见绿色荧光以证实慢病毒是否成功生产和成功感染PEFs。结果成功分离培养西藏小型猪的PEFs,按标准程

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