桔梗皂苷D对HCCLM3细胞迁移侵袭影响机制探讨

来源 :中华肿瘤防治杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:adamas522
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目的桔梗皂苷D(platycodin D,PD)是中药材桔梗的主要活性成分,对多种肿瘤细胞具有抗肿瘤活性。有研究发现,它能够促进肝癌细胞的凋亡和抑制增殖,但对细胞侵袭性的影响在很大程度上是未知的。本实验研究PD对人肝癌HCCLM3细胞迁移侵袭作用的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法不同浓度的PD处理肝癌HCCLM3细胞24和48h,MTT法检测对细胞增殖的影响;划痕实验和Transwell迁移侵袭实验检测对细胞迁移和侵袭的作用;荧光定量PCR和蛋白质印迹实验分别检测基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-9基因在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果 MTT检测结果表明,PD降低肝癌HCCLM3细胞的存活率,抑制细胞的增殖,并呈剂量依赖性,P<0.01。划痕实验结果表明,10、20和40μmol/L的PD处理细胞48h后,细胞的迁移率分别为(41.33±8.25)%、(31.87±9.83)%和(12.29±3.10)%,与对照组(86.53±6.04)%相比,差异有统计学意义,F=56.28,P<0.001。Transwell实验结果表明,10、20和40μmol/L的PD处理细胞48h后,迁移的细胞个数分别为466.33±103.94、294.67±42.53和156.68±52.27,与对照组818.33±108.15相比,差异有统计学意义,F=36.47,P<0.001;侵袭的细胞个数分别为299.33±92.93、192.67±55.63和64.00±28.90,与对照组665.67±76.84相比,差异有统计学意义,F=43.48,P<0.001。荧光定量PCR和蛋白质印迹实验进一步研究表明,10、20和40μmol/L的PD处理细胞后,MMP-2和MMP-9在mRNA水平的表达降低,与对照组相比,差异有统计学意义,F值分别为16.86和27.32,P值分别为0.002和0.001;同时,MMP-2和MMP-9在蛋白水平的表达也降低,F值分别为8.85和15.01,P值分别为0.006和0.001。结论 PD能够抑制人肝癌HCCLM3细胞的迁移和侵袭能力,可能与降低MMP-2和MMP-9的表达有关。
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