大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ的基因克隆与表达

来源 :药物生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户:oyfj2009
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本文报道用一对与大肠杆菌编码L-天门冬酰胺酶Ⅱ(L-ASPsⅡ)的基因ansB两侧序列互补的寡核苷酸L1、L2作引物,以L-ASPsⅡ的野生型生产菌CPU210009染色体为模板,经PCR扩增得到长约1.6Kb的DNA片段。该片段通过以LP1、LP2为内引物的PCR反应,证明包含了ansB基因的编码序列。将此片段经xba I、Hind Ⅲ消化,插入质粒PUC18、PUC19上构建重组质粒PUA18、PUA19,分别转化Asl.1187,Asl.1193,HB101,9637,JM107,71/18,GPU
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