【摘 要】
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目的 探讨利用猪耳软骨脱细胞基质制备海绵状多孔支架材料的方法 ,及其用作组织工程关节软骨支架材料的可行性. 方法 取新鲜猪耳软骨低温粉碎后,筛取粒径90μm以下软骨微粒经
【机 构】
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四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室·干细胞与组织工程研究室,成都,610041
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目的 探讨利用猪耳软骨脱细胞基质制备海绵状多孔支架材料的方法 ,及其用作组织工程关节软骨支架材料的可行性. 方法 取新鲜猪耳软骨低温粉碎后,筛取粒径90μm以下软骨微粒经低温脱细胞处理,冻干,用1.5%乙酸分散制备质量体积比为2%的胶状悬液,低温冻干成型.行理化性能检测测定其孔径、孔隙率及吸水率,并行组织学及扫描电镜观察.24只SD大鼠脊柱两侧皮下分别植入制备的软骨脱细胞基质海绵(实验组)和Col Ⅰ海绵(对照组);于术后1、2、4、8周取材行组织学观察,分析软骨脱细胞基质海绵在体内的吸收降解情况.取1周龄新西兰大白兔股骨骨髓,培养获取第3代BMSCs,分别采用浓度为50%(A组)及100%(B组)的软骨脱细胞基质海绵浸提液及DMEM培养液(C组)进行培养,于培养后2、4、6 d MTT法测定细胞增殖. 结果 制备的软骨脱细胞基质海绵呈白色多孔状,组织学观察示材料中无软骨细胞碎片残留,主要由胶原构成.扫描电镜显示材料呈多孔蜂巢状,孔洞相互连接,孔径均匀.吸水率为2 029%±253%,孔径为(90.66±21.26)μm,孔隙率为90.10%±2.42%.支架材料植入SD大鼠皮下后可见组织长入材料,血管生成,炎性反应较对照组轻,材料可按一定速率降解吸收.MTT法检测结果 示,浸提液培养2、4 d,3组间吸光度(A)值差异无统计学意义(P>0.05);6 d,3组间比较差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 将软骨脱细胞基质进行改性处理制备的海绵支架材料脱细胞彻底,保留了软骨ECM主要成分,无毒,具备合适的孔径和孔隙率,孔隙分布均匀,生物相容性好,可作为软骨组织工程的支架材料.
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