【摘 要】
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为识别和克隆华支睾吸虫新基因,对华支睾cDNA质粒文库进行随机筛选并测序,并利用在线生物信息学工具进行序列分析,识别华支睾吸虫未知基因,同时根据PGEX-4T-1多克隆位点及未
【机 构】
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中山大学基础医学院病原生物学部,中山大学基础医学院病原生物学部
【基金项目】
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广东省自然科学基金，广东省科技攻关项目
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为识别和克隆华支睾吸虫新基因,对华支睾cDNA质粒文库进行随机筛选并测序,并利用在线生物信息学工具进行序列分析,识别华支睾吸虫未知基因,同时根据PGEX-4T-1多克隆位点及未知基因的序列设计引物,PCR扩增目的基因,并构建原核重组质粒.结果发现了Cs vpB基因,其完整阅读框含762个碱基,编码254个氨基酸,理论分子量为27.7kDa.序列分析表明,Cs vpB蛋白与其它物种的卵黄前体蛋白有较高的同源性,所构建的重组原核表达质粒PGEX-4T-1-vpB经PCR、双酶切及测序证实与目标基因相符.
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