【摘 要】
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目的:使用Ficoll密度梯度离心法分离腹水单个核细胞,并对方法进行优化,以提高腹水单个核细胞分离的纯度。方法:收集腹水标本12份,每份标本离心富集细胞后均分为2份,分为常规
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目的:使用Ficoll密度梯度离心法分离腹水单个核细胞,并对方法进行优化,以提高腹水单个核细胞分离的纯度。方法:收集腹水标本12份,每份标本离心富集细胞后均分为2份,分为常规组和优化组。常规组使用Ficoll分离液直接分离单个核细胞;优化组先将腹水用PBS缓冲液洗涤一次,再与Ficoll分离液进行两次分离。分离后用PBS缓冲液稀释到相同体积,使用计数盘计算细胞浓度,使用台盼蓝染色法计算活率以及使用瑞氏-姬姆萨复合染色法计算细胞纯度。结果:常规组细胞浓度低于优化组,差异有统计学意义(t=-2.268,P=0.044);两组活率差异无统计学意义(t=1.856,P=0.090);常规组纯度低于优化组,差异有统计学意义(t=-6.416,P=0.000)。结论:使用PBS洗涤一次后,再进行两次分离,可提高单个核细胞的数量和纯度,而活率不受影响。
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