绿色荧光蛋白基因原核表达质粒pET32a-AcGFP1的构建及其在大肠杆菌中的高效表达

来源 :云南农业大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Ruiming123
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为了构建绿色荧光蛋白 AcGFP1基因的原核表达载体 pET32a-AcGFP1,并诱导使其在大肠杆菌中高效表达,本研究以 pIRES-AcGFP1质粒为模板,采用 PCR技术特异性扩增绿色荧光蛋白 AcGFP1基因,通过酶切和连接使其与原核表达载体 pET32a(+)构成重组子,经 PCR、酶切和测序鉴定后,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),用不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导表达绿色荧光蛋白,经 15% SDS-PAGE鉴定,结果显示:重组质粒 pET32a-AcGFP1中的
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