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利用套叠PCR技术将α-factor信号肽基因插入pAO815之EcoR I位点,构建成分泌型表达载体pAO815α-A.在不改变原克隆位点EcoR I的条件下,借助pAO815之第873位的HindⅢ位点,将pAO815 AOX1启动子873-940片段连同α-factor信号肽基因序列(246bp)插入pAO815之HindⅢ/EcoR I之间,构建成含α-factor信号肽基因的分泌型表达载体pAO815α-A.