【摘 要】
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目的探讨腺病毒载体介导转铁蛋白受体报告基因(TFRC)转染人结直肠癌Lovo细胞的最佳感染复数(MOI)、目标基因表达情况及体外MR成像情况。方法采用介导转铁蛋白受体报告基因的
【机 构】
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宁夏医科大学基础医学院,宁夏医科大学总医院放射科,四川大学华西医院放射科分子影像研究室
【基金项目】
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2015年国家自然科学基金(81560293);宁夏医科大学2014年校级科研项目(XM201459);宁夏医科大学2016年校级科研项目(XM2016037);2013年宁夏自然科学基金(NZ13159)
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目的探讨腺病毒载体介导转铁蛋白受体报告基因(TFRC)转染人结直肠癌Lovo细胞的最佳感染复数(MOI)、目标基因表达情况及体外MR成像情况。方法采用介导转铁蛋白受体报告基因的腺病毒(Ad-TFRC)载体以5、10、50、100的MOI转染Lovo细胞,以实时定量PCR检测相应mRNA表达。以浓度不一的转铁蛋白(Tf)-超微超顺磁性氧化铁(USPIO)探针转染细胞后,经普鲁士蓝染色确定最佳浓度,并以台盼蓝染色评价细胞活力。采用7.0T MR以T2、T2map及T2~*map序列对目标细胞成像,分析信号强度差异。结果 Ad-TFRC成功转染Lovo细胞,最佳MOI值为50,感染效率>90%;实时定量PCR检测显示Ad-TFRC转染Lovo细胞中TFRC蛋白表达量较空白对照Lovo细胞增多(P<0.01);普鲁士蓝染色结果示探针铁浓度为1.5μg/ml时最佳,Lovo细胞内可见大量蓝染铁颗粒;探针标记的Lovo细胞及空白对照Lovo细胞盼蓝染色拒染率分别为(93.80±1.60)%和(95.10±2.30)%,差异无统计学意义(P>0.05);体外MR T2W、T2map及T2~*map成像显示,与空白对照Lovo细胞比较,探针标记的Lovo细胞信号强度减弱(P<0.05)。结论腺病毒载体可在Lovo细胞中高效表达转铁蛋白受体报告基因,磁化标记后可成功实现Lovo细胞的体外7.0T MR显像。
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