定点突变技术鉴定弓形虫微线体蛋白6与醛缩酶的作用位点

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hawkzhou
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目的 利用定点突变技术鉴定弓形虫微线体蛋白6(MIC6)与醛缩酶的作用位点。 方法 根据GenBank中的弓形虫RH株MIC6基因序列(登录号为AF110270)及C端序列设计特异性引物,将MIC6 蛋白羧基端(MIC6C)348位色氨酸(W348)的密码子碱基突变为缬氨酸(V)的碱基,PCR扩增MIC6C W/V突变体基因片段,克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1,转化至大肠埃希菌BL21(DE3);0.8 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达GST-MIC6C W/V突变
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