双亲和柱分离纯化高纯度抗体Fab酶切片段

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目的建立利用抗原亲和柱及蛋白G亲和柱纯化抗体木瓜蛋白酶酶切产物中高纯度Fab片段的方法。方法以抗体对应的抗原蛋白与NHS-activatedSepharose4FastFlow活化偶联填料偶联制备抗原免疫亲和层析柱,将抗体木瓜蛋白酶酶切产物分剐通过蛋白G柱及抗原亲和柱制备抗体的Fab片段。通过sDS-PAGE电泳、ELISA瓣3定及临床类风湿因子阳性血清的干扰实验鉴定其制备效果。结果抗体木瓜蛋白酶酶切产物分别通过蛋白G柱及抗原亲和柱后可以依次去除抗体Fc片段及未切开的抗体、木瓜蛋白酶及失活的Fab抗体片段
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