全血中细菌DNA检测方法的建立及初步应用

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目的:采用PCR方法定性检测血中细菌DNA,快速诊断菌血症的存在.方法:提取全血DNA(包括细菌DNA),用PCR方法定性检测血中细菌16sRNA和大肠杆菌β-半乳糖苷酶DNA.结果:PCR方法可以检测出血中细菌DNA,PCR产物随着细菌DNA模板量的增加而增多;采用溶血处理全血可以增加细菌DNA检出的灵敏度,全血可冷冻保存;在肝缺血-再灌流大鼠和免疫抑制大鼠血中检出不等量的细菌DNA;部分脓毒症/发热病人血中可检测到细菌DNA的存在.结论:PCR方法检测全血细菌DNA具有简便、快速、灵敏和经济的优点,可用于实验研究及临床菌血症的诊断.
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