【摘 要】
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目的 探究miR-20b通过靶向VEGFA对鼻咽癌细胞增殖凋亡和侵袭的调控的机制.方法 使用RT-PCR检测鼻咽癌组织样本和细胞株中miR-20b和VEGFA表达水平; 将鼻咽癌CNE细胞分为空白对
【机 构】
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空军军医大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科 西安市, 710032;
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目的 探究miR-20b通过靶向VEGFA对鼻咽癌细胞增殖凋亡和侵袭的调控的机制.方法 使用RT-PCR检测鼻咽癌组织样本和细胞株中miR-20b和VEGFA表达水平; 将鼻咽癌CNE细胞分为空白对照组、阴性对照组和miR-20b转染组; 阴性对照组和miR-20b转染组分别使用空白质粒和miR-20b转染; RT-PCR检测各组VEGFA基因表达水平; 荧光色酶报告基因实验分析miR-20b和VEGFA靶向作用关系; 将鼻咽癌CNE细胞分阴性对照组、 miR-20b转染组、 VEGFA组和miR-20b+pc-VEGFA组, 使用蛋白质印迹法检测各组VEGFA蛋白表达; 使用CCK-8检测细胞增殖情况; 使用流式检测细胞凋亡情况; 使用蛋白质印迹法检测增殖、凋亡、侵袭相关蛋白表达; 使用Transwell法检测细胞侵袭情况.结果 鼻咽癌组织样本中miR-20b表达水平显著低于正常组织, VEGFA表达显著高于正常组织 (P<0.05); 荧光素酶报告实验表明miR-20b上有VEGFA的结合位点; 相比阴性对照组, miR-20b转染组miR-20b表达、细胞凋亡率、 Bax表达、 E-cadherin表达显著升高; VEGFA表达、细胞增殖率、 Ki67表达、 PCNA表达、 Bcl-2表达、细胞侵袭能力、 Vimentin表达、 Fibronectin表达显著降低 (P<0.05); 相比VEGFA组, miR-20b+pc-VEGFA组miR-20b表达、细胞凋亡率、 Bax表达、 E-cadherin表达显著升高; VEGFA表达、细胞增殖率、 Ki67表达、 PC-NA表达、 Bcl-2表达、细胞侵袭能力、 Vimentin表达、 Fibronectin表达显著降低 ( P<0.05).结论 miR-20b通过靶向VEGFA促进鼻咽癌细胞的凋亡, 抑制其增殖和侵袭迁移能力.
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