【摘 要】
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目的建立马尔堡病毒的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)可视化快速检测方法。方法人工合成马尔堡病毒保守的核蛋白(Nucleoprotein,NP)编码基因
【机 构】
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中国药科大学生命科学与技术学院,南京军区军事医学研究所,
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目的建立马尔堡病毒的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)可视化快速检测方法。方法人工合成马尔堡病毒保守的核蛋白(Nucleoprotein,NP)编码基因作为阳性标准品,设计LAMP扩增引物,以HNB作为可视化指示剂,通过LAMP浊度仪测定方法的灵敏度和特异性。并与常规PCR、实时荧光定量PCR作比较。结果建立的LAMP方法的灵敏度为100拷贝/μl,高于常规PCR及实时荧光定量PCR的灵敏度10~3拷贝/μl和10~2拷贝/μl,方法的特异性好,仅马尔堡病毒有扩增曲线且HNB指示剂颜色发生阳性改变,其他病毒扩增均为阴性。体系的扩增效率较高,试验仅需30min。结论建立的HNB-LAMP检测方法简便、快速、灵敏、特异,适用于马尔堡病毒的可视化快速检测。
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