【摘 要】
：
目的 构建含人β1转化生长因子(TGF-β1)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的复制缺陷型腺病毒载体.方法 通过聚合酶链式反应(PCR)法将带有TGF-β1 shRNA 序列构建至U6启动子(U6sh TGF-β1)下游,与T载体连接,将质粒转化人大肠杆菌.将U6sh TGF-β1连到穿梭质粒pDC316上,与腺病毒基因组质粒pBHGlox△E1、3Cre共转染293
【机 构】
：
130062,长春,吉林省长春市解放军第208医院整形烧伤科,吉林大学基础医学院,吉林大学基础医学院,吉林大学基础医学院,吉林大学基础医学院,吉林大学基础医学院
论文部分内容阅读
目的 构建含人β1转化生长因子(TGF-β1)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的复制缺陷型腺病毒载体.方法 通过聚合酶链式反应(PCR)法将带有TGF-β1 shRNA 序列构建至U6启动子(U6sh TGF-β1)下游,与T载体连接,将质粒转化人大肠杆菌.将U6sh TGF-β1连到穿梭质粒pDC316上,与腺病毒基因组质粒pBHGlox△E1、3Cre共转染293T细胞,得到重组腺病毒载体(rAd TGF-β1).经PCR鉴定正确后,进行扩增、纯化、滴度测定及感染性鉴定.结果 PCR法得到目的 片段U6sh TGF-β1,经测序,序列与设计方案完全一致.rAd TGF-β1具有良好的感染性,腺病毒滴度可达107.3TCID50/ml.双引物PCR法鉴定Ad TGF-β1可扩增出腺病毒E2b区片段及特异性片段U6sh TGFβ1.结论 成功构建了能表达TGF-β1 shRNA 的重组腺病毒载体rAd TGF-β1(A)及对照载体rAdTGF-β1(B),可能为临床应用RNA干涉--新的基因技术防治瘢痕疙瘩提供高效的方法。
其他文献
上睑下垂是指由于上睑提肌的功能减弱或消失，张眼时，上睑睑缘位置低于正常，部分或全部遮盖瞳孔，致影响正常视线。2004年，马杰等。报道经皮睑板结膜部分切除术适用于上睑提肌功能尚可（上睑提肌肌力在4～6mm以上）的轻、中度上睑下垂上睑下垂修复者。2004年4月至2006年12月，作者参照马杰的报道治疗轻、中度上睑下垂17例，取得了满意的手术效果，现报告如下。
紫外线(ultraviolet radiation,UV)对人体皮肤造成损伤已日益得到人们的重视,随之产生多种针对皮肤的防晒产品,并且根据其防护皮肤免受UV损伤的能力,建立了比较完善的评价防护指数,如防晒剂防晒指数(sun protectionfactor,SPF)和防晒黑指数(protection factor of UVA,PFA).可是,UV对头发也可以造成损伤却被人们所忽视.虽然这种损伤不
皮肤圆柱瘤属于常染色体显性遗传的罕见的良性皮肤附属器瘤,现将在我院因构成面部畸形就诊1例、家系中另2例,报告如下.
2008年6月,作者曾在庐山召开的"首届全球华人美容医学大会"上的一篇文章中写道:"爱美之心,人皆有之.美容医学整体学科的生命力根植于人类永恒的爱美之心中.她将寿比庐山山水,将与人类一道永恒."在此全句落笔之前,我未曾过多的思索和推敲,完全顺着一种顿悟思流而漫不经心地信笔写来,并毫不在意地画上了句号。
目的 探讨伴有剖宫产史的单蒂横行腹直肌肌皮瓣乳房再造术的手术方法、临床可行性及应用技术.方法 对9例剖宫产后不同时间的乳腺癌患者,在乳腺癌仿根治术后,采用即刻转移对侧单蒂横行腹直肌肌皮瓣进行乳房再造手术,腹壁横梭形皮瓣的上切口位于脐上l～2 cm,下切口于下腹壁纵行切口瘢痕的中下1/3,切取以对侧腹直肌为单蒂的下腹壁皮瓣,转移至胸壁缺损部位,修整塑造乳房外形.结果 9例乳房再造术患者转移的单蒂横行
随着社会法制不断健全，患者的自我保护意识越来越强，对医学服务的期望值也越来越高。如何做好医患沟通，提高医护质量，是各级医护人员所关注的课题。我们坚持以人为本和以患者为中心的服务宗旨，开展医患沟通，取得了较好效果和经验，现总结如下。
目的 将非渗透性低温保护剂海藻糖用于人类皮肤的低温储存，观察海藻糖对冻存皮肤组织中E钙黏素的影响，探讨海藻糖的低温保护作用。方法新鲜成人皮肤组织分为新鲜对照组、海藻糖-二甲基亚砜（T—D）组、二甲基亚砜-丙二醇（D—P）组均在-196℃液氮冻存7d，第14天复温，免疫组织化学染色对各组间皮肤进行比较。结果与新鲜皮片组相比，0．5mol／LT—D能够很好保护皮肤组织，E钙黏素的蛋白表达量与新鲜皮肤组
东方人鼻尖及鼻翼肥大者较为常见,临床上手术方法较多,选择合适的术式非常重要.自2002年以来,我们为82例鼻尖及鼻翼肥大者行缩小术,取得了较好的效果,体会如下。
血管瘤是颌面部常见的先天性良性肿瘤或血管畸形.传统的治疗方法很多,包括手术切除、放射治疗、低温冷冻、激光治疗、硬化剂注射治疗等,但各有其局限性,特别是对较大的混合型血管瘤(毛细血管瘤与海绵状血管瘤共存)治疗多不尽人意.自2005年以来,我们采用直流电铜针、平阳霉素注射及整张全厚皮片移植等综合技术治疗颌面部混合型血管瘤16例,疗效满意,现报告如下。
目的 探索重睑成形术后重睑过宽粘连畸形的修复方法.方法 重新设计重睑线宽度为6～8 mm,去除上睑瘢痕性皮肤1～2 mm,彻底松解局部粘连,利用眶隔脂肪瓣,邻近眼轮匝肌肌瓣、眼轮匝肌下脂肪垫及脂肪颗粒注射,充填上睑凹陷粘连区,重新缝合.结果 共修复16例患者20侧上睑,其中利用上睑眶隔脂肪瓣修复2例2侧,眼轮匝肌肌瓣修复3例4侧.眼轮匝肌下脂肪垫修复8例10侧,脂肪颗粒注射充填3例4侧.术后随访1