短发夹RNA抑制外源荧光素酶在肝癌细胞中的表达

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目的:构建含荧光素酶(1uciferase,luc)基因的短发夹状RNA(shorthairpin RNA,shRNA)表达质粒,并观察其在肝癌细胞Be1-7402中抑制外源荧光素酶的表达.方法:设计的两条反向重复的多聚核苷酸序列,退火形成双链DNA,再与双酶切后的载体PGE-1连接,构建pshRNA-luc重组质粒,与荧光素酶基因表达质粒pCMV-1uc共转染肝癌细胞株BEL-7402,检测其对荧光素酶表达的影响.结果:PCR和DNA序列分析证实了重组质粒构建成功.pshRNA-luc对共转染的pCMV
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