人白介素24腺病毒载体的构建与鉴定

来源 :第15次全国干扰素及细胞因子学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jasonlau999
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目的:构建人白介素24(hIL-24)的腺病毒载体,获得hIL-24重组腺病毒子,为hIL-24进行肿瘤的基因治疗奠定基础.方法:以pcDNA3.0-hIL-24重组质粒为模板PCR扩增hIL-24,酶切连接到带有GFP标记的pAdTrack-CMV质粒上,PmeI线性化重组质粒pAdTrack-CMV-hIL-24,与腺病毒质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌,荻得重组腺病毒载体pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-hIL-24经PacI线性化后转染QBI-293A包装细胞,收获腺病毒重组病毒子,RT-PCR和Western-blotting鉴定.结果:测序结果显示hIL-24序列正确,RT-PCR和Western-blotting检测到了hIL-24的表达.结论:成功构建人白介素24的重组腺病毒载体pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-hIL-24,获得了人白介素24重组病毒子Ad-hIL-24.
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