TUNEL方法结合图像分析技术检测缺血诱导的神经元损伤

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目的 缺血性神经元损伤的性质(凋亡或坏死)是神经研究领域的热点.但目前用于区分凋亡与坏死细胞的TUNEL技术,较易受主观因素的影响.方法 本实验运用图像分析技术对缺血大鼠脑的TUNEL染色切片进行多视场多参数形态定量分析,即细胞形态定量参数(核面积、周长、直径、形状因子)和含量光密度(平均光密度、积分光密度).结果 局灶性脑缺血可引起神经元凋亡和坏死.尾壳核以发生凋亡为主,且凋亡神经元的出现先于坏死神经元.缺血0.5h,尾壳核开始出现凋亡神经元.缺血3h达高峰.缺血6h,出现选择性细胞丢失.结论 图像分析技术能客观而准确地鉴别1:TUNEL染色切片上神经元损伤的性质,由此为神经领域的研究提供了一种敏感准确的形态学定量方法. The purpose of the ischemic neuronal injury nature (apoptosis or necrosis) is a hot area of ​​neurological research, but currently used to distinguish apoptotic and necrotic cells TUNEL technology, more susceptible to subjective factors.Methods The experiment using image analysis Technology multi-field multi-parameter morphometric analysis of TUNEL-stained sections of ischemic rat brain, namely quantitative parameters of cell morphology (nuclear area, perimeter, diameter, shape factor) and content optical density (average optical density, ) Results Focal cerebral ischemia induced neuronal apoptosis and necrosis.The apoptosis of caudate putamen was predominant, and the appearance of apoptotic neurons preceded the necrotic neurons.After 0.5 h of ischemia, caudate putamen began Apoptotic neurons were found at 3h after ischemia, and at 6h after ischemia, selective cell loss occurred.Conclusion Image analysis technique can objectively and accurately identify the neuronal damage characteristics of 1: TUNEL stained sections, The study provided a sensitive and accurate method of morphological quantification.
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