PDGF-R-2β胞外区基因的克隆和DNA疫苗的构建

来源 :临床儿科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mbcz123

【摘要】

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目的克隆鼠血小板源性生长因子β受体（PDGFR213）胞外区基因序列，构建DNA疫苗。方法TRIzol法提取SD仔鼠肝脏总RNA，RT-PCR法克隆PDGFR2β胞外区，回收目的基因，连接至pMDT-18载体，亚克

【作者】

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王俊吕凡邬文杰王雅杰

【机构】

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上海交通大学医学院附属新华医院小儿外科上海200092,上海第二军医大学附属长海医院肿瘤科上海200433

【出处】

：

临床儿科杂志

【发表日期】

：

2012年10期

【关键词】

：

DNA疫苗血小板源性生长因子β受体大鼠 DNA vaccine platelet-derived growth factor receptor beta

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目的克隆鼠血小板源性生长因子β受体（PDGFR213）胞外区基因序列，构建DNA疫苗。方法TRIzol法提取SD仔鼠肝脏总RNA，RT-PCR法克隆PDGFR2β胞外区，回收目的基因，连接至pMDT-18载体，亚克隆法将目标基因片段连接入真核表达质粒pcDNA3．1（＋），构建DNA疫苗pcDNA3．1（＋）-PDGFR213。脂质体转染COS7细胞，Western-Blot法检测目标基因的表达。结果PCR扩增长度为1599bp的PDGFR2β基因胞外区片段，DNA自动测序证明所获基因片段序列阅读框架正确

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