目的研究左氧氟沙星微透析探针的体内外相对回收率。方法建立高效液相色谱法（HPLC）检测左氧氟沙星的浓度,采用Kromasil-C₁₈色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-10 mmol/L磷酸二氢钾溶液（15∶85）,柱温30 ℃,紫外检测波长为294 nm,进样量10 μL。利用透析法、反透析法测定血管同心圆微透析探针的体外相对回收率,分析药物浓度、流速对相对回收率的影响。利用反透析法测定比格犬颈静脉、前列腺中探针的体内相对回收率,考察体内12 h的回收率稳定性。结果在0.1～50.0 μg/mL浓度范围内左氧氟沙星的HPLC分析方法线性关系良好（r=0.998 7）,且专属性良好,高浓度质控样品、中浓度质控样品、低浓度质控样品、定量下限样品的精密度和准确度等均符合分析要求。体外实验中,血管同心圆微透析探针的正向回收率和反向回收率差异无统计学意义（P>0.05）,药物浓度不影响体外回收率,但回收率随灌流液流速的增大而减小。体内实验中,颈静脉中探针的相对回收率为（48.46±1.94）%,前列腺中探针的相对回收率为（13.23±1.44）%,且相对回收率在12 h内稳定。结论建立的HPLC可用于左氧氟沙星微透析探针的测定,反透析法可用于测定左氧氟沙星微透析探针的体内相对回收率。