【摘 要】
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目的 探讨自噬促进剂雷帕霉素（RAPA）通过调控含核苷酸寡聚化结构域样受体（NLR）家族PYRIN域蛋白3（NLRP3）炎症小体对肿瘤坏死因子ɑ（TNF-α）诱导成纤维样滑膜细胞（FLS）增殖的影响。方法 培养FLS并分为3组：对照组、TNF-α组、RAPA组。采用CCK-8法检测细胞活力。采用免疫荧光法和透射电镜（TEM）检测FLS细胞自噬情况。采用Western blotting法检测NLRP
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（81803546）； 山东省重大专项（2019JZZY011104）； 山东省自然科学基金资助项目（ZR2018LH024）；
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目的 探讨自噬促进剂雷帕霉素（RAPA）通过调控含核苷酸寡聚化结构域样受体（NLR）家族PYRIN域蛋白3（NLRP3）炎症小体对肿瘤坏死因子ɑ（TNF-α）诱导成纤维样滑膜细胞（FLS）增殖的影响。方法 培养FLS并分为3组：对照组、TNF-α组、RAPA组。采用CCK-8法检测细胞活力。采用免疫荧光法和透射电镜（TEM）检测FLS细胞自噬情况。采用Western blotting法检测NLRP3炎症小体关键蛋白NLRP3、caspase-1及自噬标志性蛋白LC3-II/LC3-I、Beclin-1、P62的表达。结果 与对照组比较，TNF-α组FLS细胞明显增殖（P＜0.05）,并激活NLRP3炎症小体（P＜0.01）。与TNF-α组比较，RAPA组FLS增殖明显抑制（P＜0.05）,LC3-II和Beclin1表达水平明显上调（P＜0.01）,P62、NLRP3和caspase-1的表达水平均降低（P＜0.05）。结论 RAPA可以抑制TNF-α诱导的FLS增殖，其机制可能与提高自噬、抑制NLRP3炎症小体的激活有关。
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