观察纳米细菌(NB)与人胆囊上皮细胞的相互作用，探讨瓷化胆囊形成的机制。
方法抽取瓷化胆囊及正常胆囊中胆汁，培养NB，电镜下观察培养出NB形态。取部分正常胆囊，原代培养人胆囊上皮细胞，免疫荧光检测上皮细胞标记角蛋白(CK19)的表达情况。将1.0麦氏浊度(MCF)的NB分别诱导人胆囊上皮细胞0、12、24、48 h，通过检测细胞增殖及细胞计数试剂盒(CCK-8)、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒、流式细胞仪检测细胞的损伤及凋亡率，蛋白质印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、细胞色素C(Cyt-C)、活化半胱氨酸蛋白酶-9(cleaved Caspsae-9)蛋白的表达。
结果瓷化胆囊与正常胆囊胆汁培养出NB阳性率分别为88.9%与15.0%，差异有统计学意义(χ2＝14.39，P<0.01)。电镜下可见NB呈圆形或类圆形，大小不等，直径约80 nm。荧光显微镜下原代培养人胆囊上皮细胞CK19蛋白免疫荧光阳性，NB干预胆囊上皮细胞0、12、24、48 h，细胞存活率24、48 h显著下降，差异有统计学意义(F＝305.501，P<0.01)，LDH释放量24、48 h显著升高，差异有统计学意义(F＝5 351.109，P<0.01)，细胞凋亡在24、48 h显著增加，差异有统计学意义(F＝597.457，P<0.01)。Western blot检测bcl-2/bax值，在24、48 h显著下降，差异有统计学意义(F＝1 336.833，P<0.01)，Cyt-C相对表达量12、24、48 h明显升高，差异有统计学意义(F＝1 422.101，P<0.01)，cleaved Caspsae-9在24、48 h显著增加，差异有统计学意义(F＝2 348.061，P<0.01)。
结论NB通过线粒体途径促进人胆囊上皮细胞凋亡，可能与瓷化胆囊的形成密切相关。