红三叶和白三叶愈伤组织的诱导和胚性细胞悬浮系的建立

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以红三叶野生品种巴东红三叶的叶片为外植体,在MB-1至MB-9的固体培养基上诱导愈伤组织,筛选出最佳培养基是MB-9培养基;以白三叶栽培品种“路易斯安娜”和“Huca”的叶片为外植体,接种在MB-9固体培养基上诱导愈伤组织,愈伤组织形成后均经MB-9固体培养基上继代3~4次,获得胚性愈伤组织后再转至MB+3mg/L2,4-D+0.7mg/LBA+0.2mg/LNAA+2mg/L甘氨酸+500mg/LCH+3%蔗糖的液体培养基中,经强化培养两个月后获得胚性细胞悬浮系。实验结果表明,缩短换液时间(每隔3~4d换液一次)可加快胚性细胞悬浮系的建立。 Using the leaves of red clover, the red clover, as the explants, the callus was induced on the solid medium of MB-1 to MB-9, and the best culture medium was selected as MB-9 medium. The leaves of white clover cultivars “Louisiana” and “Huca” were used as explants and inoculated on MB-9 solid medium to induce callus. After the callus was formed, the callus was subcultured on MB-9 solid medium 3 ~ 4 times. After embryogenic callus was obtained, it was transferred to liquid medium of MB + 3mg / L2, 4-D + 0.7mg / LBA + 0.2mg / L NAA + 2mg / L glycine + 500mg / LCH + 3% sucrose, After obtaining embryogenic cell suspension system. Experimental results show that shortening the fluid exchange time (every 3 ~ 4d liquid change once) can accelerate the establishment of embryogenic cell suspension system.
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