药用植物诃子ISSR-PCR反应体系的建立与优化

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目的建立和优化药用植物诃子的ISSR-PCR反应体系。方法以诃子叶片为实验材料,采用CTAB法提取诃子DNA为模板,通过单因素和双因素实验,研究诃子ISSR-PCR反应体系中DNA模板、TaqDNA聚合酶、Mg^2+、引物、dNTPs等的用量,以及退火温度对扩增结果的影响。结果建立了适合诃子ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在50μL体系中含有1×PCR Buffer、DNA模板50~100ng、TaqDNA聚合酶3U、Mg^2+2mmol/L、引物0.8mmol/L、dNTPs0.3mmol
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