【摘 要】
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利用几丁质酶基因和β-1,4-葡聚糖酶基因构建双价基因表达载体,为木霉转化奠定基础。利用限制性内切酶酶切得到目的基因片段,通过T4 DNAligase将基因插入表达框中,并采用PCR
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)“微生物杀菌剂研究与产品创制”(2011AA10A205);农业部行业(农业)科技专项“防治霜霉病有益微生物筛选与生防制剂研制”(201203035);农业部行业(农业)科技专项“保护地果蔬灰霉病绿色防控技术研究与示范”(201303025)
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利用几丁质酶基因和β-1,4-葡聚糖酶基因构建双价基因表达载体,为木霉转化奠定基础。利用限制性内切酶酶切得到目的基因片段,通过T4 DNAligase将基因插入表达框中,并采用PCR、酶切和核苷酸序列分析验证双价基因表达载体的正确性。利用启动子CaMV35S和终止子PolyA构建几丁质酶基因chi42的表达框,获得表达载体pC1302-C42；利用启动子CaMV35S和终止子Nos构建β-1,4-葡聚糖酶基因glu14的表达框,获得表达载体pC1300-2-G14；在单基因表达载体的基础上,通过串联构建双
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