【摘 要】
：
目的 探讨连翘提取物是否通过抑制长链非编码RNA(lncRNA)PVT1来保护脂多糖(LPS)所致的心肌细胞损伤.方法 LPS损伤心肌细胞H9c2,并给予不同质量浓度连翘提取物.采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测cleaved-caspase3、pro-caspase3蛋白表达,试剂盒检测丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,RT-qPCR检测PVT1表达.在H9c2细胞中转染PVT1小干扰RNA si-PVT1
【机 构】
：
武汉市红十字会医院心血管内科,湖北武汉430015;武汉市红十字会医院呼吸内科,湖北武汉430015;华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科,湖北武汉430022
论文部分内容阅读
目的 探讨连翘提取物是否通过抑制长链非编码RNA(lncRNA)PVT1来保护脂多糖(LPS)所致的心肌细胞损伤.方法 LPS损伤心肌细胞H9c2,并给予不同质量浓度连翘提取物.采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测cleaved-caspase3、pro-caspase3蛋白表达,试剂盒检测丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,RT-qPCR检测PVT1表达.在H9c2细胞中转染PVT1小干扰RNA si-PVT1,并以LPS诱导损伤,或在细胞中转染PVT1过表达载体pcDNA-PVT1,并给予LPS和连翘提取物,利用前述方法考察细胞损伤情况.结果 中、高剂量连翘提取物降低LPS处理H9c2细胞的凋亡率、cleaved-caspase3表达、MDA水平、LDH活性、PVT1表达,增加pro-caspase3表达及SOD、GSH-Px活性,差异均具有统计学意义(P＜0.05);干扰PVT1减弱LPS处理H9c2细胞的凋亡率、cleaved-caspase3表达、MDA水平、LDH活性,增加pro-caspase3表达及SOD、GSH-Px活性,差异均具有统计学意义(P＜0.05).PVT1过表达后,连翘提取物对LPS处理的H9c2细胞凋亡率、leaved-caspase3表达、MDA水平、LDH活性的抑制作用被逆转,并对pro-caspase3表达及SOD、GSH-Px活性的促进作用也被逆转.结论 连翘提取物通过抑制PVT1的表达、抑制LPS处理的心肌细胞凋亡并减轻其氧化应激损伤,从而保护LPS所致的心肌损伤.
其他文献
目的 优化欧前胡素双层渗透泵控释片处方.方法 以PEON750用量、NaCl用量、包衣增重为影响因素,累积释放度、释药线性为评价指标,Box-Behnken响应面法优化处方.结果 最佳处方为PEO N750用量116.3 mg/片,NaCl用量22.5 mg/片,包衣增重6.4％,平均累积释放度为93.79％,R2为0.984 2,体外释药不受pH值的影响.结论 该方法稳定可靠,可用于欧前胡素双层渗透泵控释片处方的筛选.
目的 比较松脂醇二葡萄糖苷在人和大鼠肝微粒体中的代谢.方法 将人和大鼠肝微粒体在体外分别与松脂醇二葡萄糖苷共同孵育,高效液相色谱串联四极杆质谱(HPLC/QQQ-MS)法分析该成分及其代谢产物,二级质谱扫描来推测化学结构.结果 最佳条件为肝微粒体质量浓度20 mg/mL,孵育时间120 min,松脂醇二葡萄糖苷在人和大鼠肝微粒体中的代谢率分别为9.4％和4.8％.松脂醇二葡萄糖苷发生脱糖反应生成松脂素,后者进一步发生氧脱甲基、脱羟基、开环生成不同代谢产物.结论 松脂醇二葡萄糖苷能在人和大鼠肝微粒体中发生代
目的 建立UPLC法同时测定双黄升白复方(黄芪、黄精、女贞子等)中蕊异黄酮葡萄糖苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、宝霍苷Ⅰ、红景天苷、新北美圣草苷、柚皮苷、特女贞苷、芒柄花黄素的含量.方法 该药物50％甲醇提取液的分析采用Aglient Eclipse Plus C18 RRHD色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;检测波长254、270、280 nm.结果 11种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.999 6),平均加样回
目的 建立筋骨伤喷雾剂(赤胫散、淫羊藿、赤芍等)HPLC指纹图谱,并测定没食子酸、没食子酸乙酯、芍药苷、鞣花酸、山柰苷、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷含量.方法 该药物滤液的分析采用ACE C18-AR色谱柱(250 mmx4.6 mm,5 μm);流动相乙腈-0.1％磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mi/min;柱温30℃;检测波长230、254、270 nm.结果 14批样品指纹图谱中有36个共有峰,相似度均大于0.916.8种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 6),平均加样回收率93.37
目的 建立HPLC法同时测定强力定眩片(天麻、杜仲、杜仲叶等)中天麻素、没食子酸、5-羟甲基糠醛、对羟基苯甲醇、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、巴利森苷B、松脂醇二葡萄糖苷、巴利森苷C、巴利森苷A、藁本内酯、蒙花苷的含量.方法 该药物50％甲醇提取液的分析采用Lamdo Stamsil C18色谱柱(250 mmx4.6 mm,5 μm);流动相乙腈-0.05％磷酸,梯度洗脱;体积流量0.7 mL/min;柱温20℃;检测波长220、280 nm.结果 13种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.999 0)
目的 探讨二十五味鬼臼丸对围绝经期综合征大鼠模型植物雌激素样作用及其对雌激素受体的调控.方法 采用切除双侧卵巢的方法构建围绝经期综合征大鼠模型,将60只SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇组和二十五味鬼臼丸组,每组15只.围绝经期综合征模型建立成功后,假手术组和模型组给予等容量生理盐水,雌二醇组给予0.1 mg/kg戊酸雌二醇,二十五味鬼臼丸组给予0.36 g/kg二十五味鬼臼丸,隔日灌胃,连续8周.计算子宫指数(UI),ELISA检测血清雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)水
目的 建立HPLC法同时测定防风通圣丸(川芎、桔梗、甘草等)中川芎嗪、栀子苷、升麻素苷、甘草苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、黄芩苷、桔梗皂苷D、黄芩素的含量.方法 该药物80％甲醇提取液的分析采用Venusil MP C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相乙腈-0.1％醋酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长260 nm;ELSD漂移管温度90℃;雾化气体积流量2.5 mL/min;雾化温度36℃.结果 8种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 5),
目的 探讨玉泉丸对糖尿病肾病大鼠GSK-3β/Nrf2通路及肾小球内皮损伤标志物YKL-40表达的影响.方法 采用高脂高糖饲料喂养结合一次性腹腔注射链脲佐菌素制备大鼠糖尿病肾病模型,大鼠随机分为正常组,模型组,玉泉丸低、中、高(4、8、12 g/kg)剂量组和二甲双胍(50 mg/kg)组(阳性对照),每组10只.全自动生化分析仪检测血糖、甘油三酯、总胆固醇、肌酐、尿素和24 h尿微量白蛋白水平,HE染色观察肾组织病理学变化并评分,ELISA检测血清YKL-40、TNF-α、IL-6、内皮素(ET)水平及
目的 探讨半夏泻心汤对胃癌细胞来源外泌体诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、迁移、侵袭的影响.方法 荧光染料1,1\'-双十八烷基-3,3,3\',3\'-四甲基吲哚羰花青高氯酸盐(Dil)标记胃癌细胞来源外泌体,制备半夏泻心汤含药血清.实验分为空白组,模型组,半夏泻心汤低、中、高剂量组及Shh阻断剂组,各组上室加入BMSCs细胞悬液,下室加入无外泌体血清的培养基,除空白组外其他各组下室加入胃癌细胞来源外泌体,模型组及空白组上室加入含10％正常对照血清,半夏泻心汤低、中、高剂量组上室内加入
目的 探讨黄芪颗粒联合常规治疗对重症肺炎患者的临床疗效.方法 98例患者随机分为对照组和观察组,每组49例,对照组给予常规治疗(机械通气、内环境纠正、吸痰等),观察组在对照组基础上加用黄芪颗粒,疗程2周.检测临床疗效、中医证候评分、APACHE Ⅱ评分、CPIS评分、症状控制情况、血气指标(PaO2、PaCO2、PaO2/FiO2、SaO2)、肺功能指标(FEV1、FVC)、炎症因子(CRP、PCT、IL-6、TNF-α、IL-17)、免疫功能指标(CD4+、CD8+、NK细胞总数)、并发症及不良反应发生