【摘 要】
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目的 探讨连翘提取物是否通过抑制长链非编码RNA(lncRNA)PVT1来保护脂多糖(LPS)所致的心肌细胞损伤.方法 LPS损伤心肌细胞H9c2,并给予不同质量浓度连翘提取物.采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测cleaved-caspase3、pro-caspase3蛋白表达,试剂盒检测丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,RT-qPCR检测PVT1表达.在H9c2细胞中转染PVT1小干扰RNA si-PVT1
【机 构】
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武汉市红十字会医院心血管内科,湖北武汉430015;武汉市红十字会医院呼吸内科,湖北武汉430015;华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科,湖北武汉430022
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目的 探讨连翘提取物是否通过抑制长链非编码RNA(lncRNA)PVT1来保护脂多糖(LPS)所致的心肌细胞损伤.方法 LPS损伤心肌细胞H9c2,并给予不同质量浓度连翘提取物.采用流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测cleaved-caspase3、pro-caspase3蛋白表达,试剂盒检测丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,RT-qPCR检测PVT1表达.在H9c2细胞中转染PVT1小干扰RNA si-PVT1,并以LPS诱导损伤,或在细胞中转染PVT1过表达载体pcDNA-PVT1,并给予LPS和连翘提取物,利用前述方法考察细胞损伤情况.结果 中、高剂量连翘提取物降低LPS处理H9c2细胞的凋亡率、cleaved-caspase3表达、MDA水平、LDH活性、PVT1表达,增加pro-caspase3表达及SOD、GSH-Px活性,差异均具有统计学意义(P<0.05);干扰PVT1减弱LPS处理H9c2细胞的凋亡率、cleaved-caspase3表达、MDA水平、LDH活性,增加pro-caspase3表达及SOD、GSH-Px活性,差异均具有统计学意义(P<0.05).PVT1过表达后,连翘提取物对LPS处理的H9c2细胞凋亡率、leaved-caspase3表达、MDA水平、LDH活性的抑制作用被逆转,并对pro-caspase3表达及SOD、GSH-Px活性的促进作用也被逆转.结论 连翘提取物通过抑制PVT1的表达、抑制LPS处理的心肌细胞凋亡并减轻其氧化应激损伤,从而保护LPS所致的心肌损伤.
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