塔城病毒I型TaqMan探针法荧光定量PCR检测方法的建立

来源 :中国动物传染病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiebaidexue
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建立快速特异的蜱传塔城病毒I型(TcTV-I)荧光定量PCR检测方法,用于TcTV-I的初步筛查。选用TcTV-I 糖蛋白G基因设计特异性引物以及TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR检测方法。建立的实时荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性,与TcTV-Ⅱ、SFTSV、TBEV、DBSV、ALSV等常见蜱传病毒均无交叉反应;标准曲线的循环阈值(Ct值)与模板拷贝数之间呈良好的线性关系,线性相关系数R2=0.9999;具有良好的敏感性,最低检测限为1.10X101 copies·μL-1,灵敏度是常规PCR的103倍;具有较好的稳定性,组内和组间的变异系数均低于2%。采用本方法对辽宁、内蒙古及新疆地区的425份蜱样本就行检测,只有新疆地区的19份蜱样本呈阳性。结果表明本研究建立的实时荧光定量PCR方法具有较高的特异性、敏感性和稳定性,可用于TcTV-I的快速检测、流行病学调查和疫情监测等。
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